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圓腹雅羅魚(yú)

染色體

采集地點(diǎn):天津市,換新水產(chǎn)良種場(chǎng)

測(cè)樣日期:2007年

取樣部位:腎

取樣數(shù)量:6尾

檢測(cè)單位:天津市換新水產(chǎn)良種場(chǎng)

實(shí)驗(yàn)方法:體內(nèi)注射小牛血清和秋水仙素短期培養(yǎng),經(jīng)低滲、固定、低片,干凍玻片制片,吉姆薩染色。

圖片說(shuō)明:染色體中期核型

性別:雌、雄

染色體數(shù):2n=50

核型方式:2n=18m+22sm+4st+6t


mtDNA分析

(1)

采集時(shí)間:1981-1985年

樣品來(lái)源:新疆賽里木湖

取樣部位:肌肉組織

樣本數(shù):2尾巴

實(shí)驗(yàn)技術(shù):PCR擴(kuò)增

目的基因:mtDNA Cytb

引物信息::L14724:5’ 一G A C T T G A A A A A C C A C C G T T G一 3’

H15149:5 ’一C C T C A GA A G G A T A T T T GT C CTC一3’

擴(kuò)增條件:

擴(kuò)增反應(yīng)總體積為50微升,其中含有50 ng的模板DNA,2.5 U的Taq DNA聚合酶,1×buffer,每種引物濃度分別為0.2 μmol/L,dNTP濃度為100μmol/L,Mg 濃度為1.5 mmol/L。PCR擴(kuò)增反應(yīng)在PE PTC一100 熱循環(huán)儀上進(jìn)行。反應(yīng)條件為:95℃ 2 min后進(jìn)行36個(gè)循環(huán)的94℃ 30 S、49℃ 30 S、72℃ 1 min。之后,反應(yīng)于72℃延伸10 min,4℃結(jié)束。

擴(kuò)增片段大小:489bp

圖片說(shuō)明:高體雅羅魚(yú)等三種雅羅魚(yú)mtDNA Cytb擴(kuò)增結(jié)果

參考文獻(xiàn):

胡文革,段子淵,王金富等. 新疆3種雅羅魚(yú)線粒體DNA細(xì)胞色素b序列的差異與系統(tǒng)進(jìn)化 [J]. 動(dòng)物學(xué)雜志, 2005, 40 (3) 6 .

(2)

采集時(shí)間:1981-1985年

樣品來(lái)源: 新疆賽里木湖

取樣部位:肌肉

樣本數(shù):1尾

實(shí)驗(yàn)技術(shù):PCR擴(kuò)增

目的基因:mtDNA D-loop

引物信息:

P2-U(5’ -TTAACTCCCAC—CCCTGGCT-3’ )

P1-L(5’ –CACGTTCTCGAACCTTCCTT-3’


擴(kuò)增條件:

擴(kuò)增反應(yīng)總體積為50 uL,其中含有50 ng的模板DNA,1.6 U的Taq DNA聚合酶,1 X Bufer,每種引物濃度分別為0.2μmol/L,dNTP濃度為100pmol/L,Mg離子濃度為1.5 pmol/L。PCR擴(kuò)增反應(yīng)在PE PTC-100 熱循環(huán)儀上進(jìn)行。反應(yīng)程序?yàn)椋?5℃ 2 min;94℃ 30 S,51℃ 30 S,72℃ 1 min 30 S,進(jìn)行35個(gè)循環(huán);最后再72℃延伸10 min,4℃結(jié)束。

擴(kuò)增片段大小:827bp

參考文獻(xiàn):

胡文革,段子淵,王金富等. 新疆3種雅羅魚(yú)線粒體DNA控制區(qū)序列的差異和系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系 [J]. 遺傳學(xué)報(bào), 2004, 31 (9) 6 .


 
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