貝加爾雅羅魚

mtDNA分析

（1）

采集時(shí)間：1981-1985年

樣品來(lái)源：新疆賽里木湖，新疆額爾齊斯河

取樣部位：肌肉組織

樣本數(shù)：10尾巴

實(shí)驗(yàn)技術(shù)：PCR擴(kuò)增

目的基因：mtDNA Cytb

引物信息：：L14724：5’ 一G A C T T G A A A A A C C A C C G T T G一 3’

H15149：5 ’一C C T C A GA A G G A T A T T T GT C CTC一3’

擴(kuò)增條件：

擴(kuò)增反應(yīng)總體積為50微升，其中含有50 ng的模板DNA，2.5 U的Taq DNA聚合酶，1×buffer，每種引物濃度分別為0．2 μmol／L，dNTP濃度為100μmol／L，Mg 濃度為1．5 mmol／L。PCR擴(kuò)增反應(yīng)在PE PTC一100 熱循環(huán)儀上進(jìn)行。反應(yīng)條件為：95℃ 2 min后進(jìn)行36個(gè)循環(huán)的94℃ 30 S、49℃ 30 S、72℃ 1 min。之后，反應(yīng)于72℃延伸10 min，4℃結(jié)束。

擴(kuò)增片段大小：489bp

圖片說(shuō)明：高體雅羅魚等三種雅羅魚mtDNA Cytb擴(kuò)增結(jié)果

參考文獻(xiàn)：

胡文革,段子淵,王金富等. 新疆3種雅羅魚線粒體DNA細(xì)胞色素b序列的差異與系統(tǒng)進(jìn)化 [J]. 動(dòng)物學(xué)雜志, 2005, 40 (3) 6 .

（2）

采集時(shí)間：1981-1985年

樣品來(lái)源： 新疆賽里木湖，新疆額爾齊斯河

取樣部位：肌肉

樣本數(shù)：20尾

實(shí)驗(yàn)技術(shù)：PCR擴(kuò)增

目的基因：mtDNA D-loop

引物信息：

P2-U(5’ -TTAACTCCCAC—CCCTGGCT-3’ )

P1-L(5’ –CACGTTCTCGAACCTTCCTT-3’

擴(kuò)增條件：

擴(kuò)增反應(yīng)總體積為50 uL，其中含有50 ng的模板DNA，1．6 U的Taq DNA聚合酶，1 X Bufer，每種引物濃度分別為0.2μmol／L，dNTP濃度為100pmol／L，Mg離子濃度為1.5 pmol／L。PCR擴(kuò)增反應(yīng)在PE PTC-100 熱循環(huán)儀上進(jìn)行。反應(yīng)程序?yàn)椋?/span>95℃ 2 min；94℃ 30 S，51℃ 30 S，72℃ 1 min 30 S，進(jìn)行35個(gè)循環(huán)；最后再72℃延伸10 min，4℃結(jié)束。

擴(kuò)增片段大小：827bp

參考文獻(xiàn)：

胡文革,段子淵,王金富等. 新疆3種雅羅魚線粒體DNA控制區(qū)序列的差異和系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系 [J]. 遺傳學(xué)報(bào), 2004, 31 (9) 6 .

染色體

采集地點(diǎn)：新疆，伊犁河，三道河口

取樣部位：腎

取樣數(shù)量：3尾

檢測(cè)單位：哈密師范學(xué)校

實(shí)驗(yàn)方法：體內(nèi)注射小牛血清和秋水仙素短期培養(yǎng)，經(jīng)低滲、固定、低片，干凍玻片制片，吉姆薩染色。

染色體數(shù)：2n=50

核型方式：2n=8m+16sm+26t