由淡水魚類基因組學與基因編輯創新團隊匡友誼等人完成的“斑馬魚成骨細胞體外培養方法”獲得國家發明專利授權,授權專利號:ZL202110520788.9。
本發明涉及一種斑馬魚脊椎骨組織成骨細胞的培養方法。斑馬魚脊椎成骨細胞系是開展魚類骨骼發育機制研究不可或缺的材料,發明人利用利用組織塊貼壁法,以斑馬魚脊椎組織為材料成功構建了斑馬魚脊椎成骨細胞系。該方法建立的細胞系生長迅速穩定,復蘇狀態良好,經鑒定細胞系中期分裂相的染色體數目、核型與斑馬魚一致,堿性磷酸酶、茜素紅礦化結節染色及von Kossa氏礦化結節法染色均呈陽性,成骨細胞發育標志基因runx2a、bglapl和alp的表達量顯著高于斑馬魚肌肉組織,且流式RNA-FISH檢測結果表明98%以上的成骨細胞均表達sp7。
本方法簡單易行且成本較低,有效避免了原代組織用酶消化培養方法作用時間長、對細胞損傷大、影響細胞貼壁及成活的問題。